熒光染料標(biāo)記在DNA檢測(cè)中的應(yīng)用是分子生物學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)重要進(jìn)展。熒光檢測(cè)依賴于熒光基團(tuán)在吸收光能后發(fā)射光的特性。熒光基團(tuán)是一類特殊的分子,它們能夠在吸收特定波長(zhǎng)的光后,以較長(zhǎng)的波長(zhǎng)重新發(fā)射光。通過(guò)把熒光染料標(biāo)記在寡核苷酸引物的5'端,擴(kuò)增后,使相應(yīng)PCR產(chǎn)物的一條鏈均攜帶標(biāo)記引物的熒光染料。這些帶有特定熒光物質(zhì)的擴(kuò)增產(chǎn)物在后續(xù)的電泳分離檢測(cè)設(shè)備上,可被清晰識(shí)別。通過(guò)測(cè)量熒光信號(hào)的變化來(lái)檢測(cè)和分析DNA的存在、結(jié)構(gòu)和功能。
在STR分析中,通常使用多色熒光標(biāo)記的引物來(lái)同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)STR位點(diǎn)。這些熒光標(biāo)記具有不同的激發(fā)和發(fā)射光譜,使得在單一實(shí)驗(yàn)中可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)STR位點(diǎn)。例如,常用的熒光染料包括FAM、HEX、TET和VIC等。
目前市場(chǎng)上主流的STR試劑盒大多基于五色或六色熒光復(fù)合擴(kuò)增技術(shù)。這些試劑盒能夠同時(shí)檢測(cè)一定數(shù)量的STR位點(diǎn),通常在20—44個(gè)之間。雖然這一技術(shù)已經(jīng)能夠滿足大部分常規(guī)法醫(yī)DNA分析的需求,但在面對(duì)復(fù)雜樣本,如微量DNA、降解DNA或混合DNA等情況時(shí),其局限性變得尤為明顯。五色或六色熒光系統(tǒng)的通道數(shù)量限制了可以同時(shí)檢測(cè)的STR位點(diǎn)數(shù),這可能導(dǎo)致信息的丟失或分辨率的不足。此外,當(dāng)擴(kuò)增的DNA片段長(zhǎng)度超過(guò)300bp時(shí),較長(zhǎng)片段的擴(kuò)增效率通常較低,容易出現(xiàn)丟峰現(xiàn)象,這進(jìn)一步影響了數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。
隨著法醫(yī)DNA分析需求的不斷增長(zhǎng)以及技術(shù)的持續(xù)進(jìn)步,傳統(tǒng)的五色或六色熒光復(fù)合擴(kuò)增技術(shù)已無(wú)法完全滿足復(fù)雜案件處理的需求。因此,開(kāi)發(fā)基于更多熒光通道的STR試劑盒具有重要的實(shí)際意義。
此次研發(fā)10色熒光檢測(cè)復(fù)合擴(kuò)增Matrix 體系的構(gòu)建方法,突破現(xiàn)有的五色或六色熒光DNA檢測(cè)技術(shù)的限制,擴(kuò)展熒光通道和基因座數(shù)目,極大提升熒光DNA檢測(cè)的效率和能力。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1.十種熒光染料發(fā)射光譜能夠區(qū)分且互不滲透;
2.十種熒光發(fā)射強(qiáng)度高,均衡性好;
3.可兼容更多的STR基因座,檢測(cè)效率、準(zhǔn)確性和分辨率高,提供了更為豐富的遺傳信息;
4.可容納更多小片段,極大提高微量樣本、降解樣本等疑難品檢出率,減少了大片段丟峰的可能性;
5.促進(jìn)了法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新,推動(dòng)了DNA分析技術(shù)向更高精度和更廣應(yīng)用范圍發(fā)展。
(十色光譜)